Kultursystem zur in-vitro-Diagnostik von durch Bakterien und Hefepilze bedingten Infektionen mit Keimbestimmung und Antibiogramm

Speed® Biogram ist ein Kultursystem zur Diagnostik von durch Bakterien und Hefepilze bedingten Infektionen. Der Test eignet sich:

- Zur Keimbestimmung pathogener Erreger (Bakterien und Hefepilze), die
  beteiligt sind an Infektionen der Haut, der Harnwege sowie der Ohren von
  Hunden und Katzen.
- Zum raschen Erstellen eines Antibiogramms, für die Wahl des wirksamsten
  antibakteriellen Therapeutikums innerhalb der in der Veterinärmedizin
  verfügbaren Antibiotika.

Das Testverfahren kann einfach und direkt anhand von Körperflüssigkeiten oder zellhaltigen Proben durchgeführt werden. Innerhalb von 24h liegt ein Antibiogramm vor und innerhalb von 48 h können die entsprechenden bakteriellen Erreger (innerhalb einiger Tage die Hefepilzerreger) identifiziert werden.

Das patentierte Schnelltestverfahren berücksichtigt dabei die zwischen den unterschiedlichen pathogenen Keimen herrschenden Synergien und Antagonismen, die Faktoren des infizierten Milieus (direktes Antibiogramm), sowie die Keimkonzentration am Infektionsort (Inokulum-Effekt).

Testprinzip
Die Testgalerie von Speed® Biogram beinhaltet 24 Testvertiefungen mit selektiven Nährmedien, welche folgenden Testeinheiten entsprechen:

• 13 Testvertiefungen zum Testen der Antibiotika-Empfindlichkeit der
   beteiligten Keime (Antibiogramm).

   Antibiogramm:
   Amoxicillin
   Amoxicillin + Clavulansäure
   Cefalexin
   Clindamycin
   Difloxacin
   Doxycyclin
   Enrofloxacin
   Flumequin
   Gentamicin
   Neomycin
   Marbofloxacin
   Spiramycin
   Polymyxin B

• 6 Testvertiefungen zur Keimbestimmung bakterieller Erreger

   Keimbestimmung:
   E. Coli
   Enterobakterien
   Proteus
   Pseudomonaden
   Staphylokokken
   Streptokokken

• 2 Testvertiefungen zur Keimbestimmung von Hefen

   Keimbestimmung:
   Candida Malassezia

• 3 Testvertiefungen (BVT Patent) zur Validation der Inkubationszeit und zur
   Verifikation des Wachstums pathogener Keime.

   Diese Testvertiefungen sind gekennzeichnet mit IL (Incubation Limit),
   + und –. Die mit IL gekennzeichnete Testvertiefung muss als einzige nicht mit
   Probematerial inokuliert werden. Der Farbumschlag in der IL-Testvertiefung
   dient zur Kontrolle des korrekten Ablesezeitpunktes des Antibiogramms.
   Dadurch kann zwischen dem primären Effekt pathogener Keime und dem
   sekundären Einfluss eventueller Kontaminationskeime unterschieden
   werden. Die mit + gekennzeichnete Testvertiefung ist ein Indikator dafür, ob
   eine Präsenz pathogener Keime überhaupt vorliegt. Ein Farbumschlag dieser
   Testvertiefung entspricht einer Keimkonzentration von ≥10³ KbE/ml.

Das Ablesen der Ergebnisse erfolgt für jede Testvertiefung einzeln. Bakterielles Wachstum wird durch einen Farbumschlag des Nährmediums ersichtlich, welcher spezifisch ist für jede Testeinheit. Auf diese Weise wird die Antibiotika-Empfindlichkeit der bakteriellen Erreger in den entsprechenden 13 Antibiogramm-Testvertiefungen angezeigt, sowie die Art der pathogenen Keime anhand der 8 Keimidentifikations-Testvertiefungen nachgewiesen.

Vorsichtsmassnahmen und Hinweise
- Die einzelnen Komponenten des Testkits vor der Verwendung mindestens
  15 Minuten lang Zimmertemperatur annehmen lassen.
- Die Kulturmedien der einzelnen Chargen und Verpackungen dürfen nicht
  untereinander ausgetauscht werden.
- Alle Chargen unterliegen einer Qualitätskontrolle und ihre Spezifikationen
  erfüllen die notwendigen Standards von in-vitro-Diagnostika.

Testverfahren
Vorbereiten des Probematerials
Jedes Probematerial das der Haut, der Harnwege oder den Ohren entnommen wurde kann verwendet werden, unter der Bedingung dass die Entnahme unter strikt aseptischen Kautelen erfolgt ist und keine lokalen Antiseptika (Iod, Alkohol, Phenole...) oder Antibiotika verwendet wurden. Das Probematerial (zellhaltige Probe oder 2 Tropfen Körperflüssigkeit) unverzüglich und vorsichtig in das Konservierungsmedium geben. Die Mischung gut homogenisieren (vorsichtig schütteln). Bis zur weiteren Verwendung kann das so vorbereitete Fläschchen mit dem Probematerial bei Zimmertemperatur ( oder während 48 h bei 4-8°C) gelagert werden.

Beimpfen der Testgalerie
Schritt 1: Testgalerie aus der Umhüllung entfernen, Name des Tieres und Datum auf der Klebeetikette anbringen. Etikette anschliessend entfernen und vorübergehend auf einemRand der Galerie anbringen, um die Kennzeichnung der Testgalerie sicherzustellen.

Schritt 2: Fläschchen mit Kulturmedium öffnen, mit steriler Einmalpipette 3 Tropfen Kulturmedium entnehmen und in die IL-Testvertiefung geben. (Hinweis: In die IL-Testvertiefung wird kein Probematerial eingebracht).

Schritt 3: Zellhaltiges Probematerial oder 2 Tropfen Körperflüssigkeit mit der Pipette in das Konservierungsmedium einbringen, die Mischung danach homogenisieren.

Schritt 4: 4 Tropfen der homogenisierten Mischung des Konservierungsmediums mit der Einmalpipette in das zuvor geöffnete Fläschchen mit Kulturmedium geben und durch vorsichtiges Schütteln den Inhalt homogenisieren (vorsichtig schütteln).

Schritt 5: Alle Testvertiefungen (ausser die IL-Vertiefung) der Testgalerie einzeln inokulieren, indem jeweils 3 Tropfen des beimpften Kulturmediums mit der selben Einmalpipette aufgetragen werden.

Schritt 6: In die STAPH-Testvertiefung zusätzlich 2 Tropfen zusätzliches Kulturmedium für Staphylokokken („Supp Staph“) geben.

Schritt 7: In jede Testvertiefung, mit Ausnahme der E.Coli- und Pseudo-Testvertiefungen, 2 Tropfen Paraffinöl hinzufügen.

Schritt 8: Die zuvor bezeichnete und auf dem Rand angebrachte Klebeetikette auf der Testgalerie neu positionieren. Testgalerie auf den für den Inkubator vorgesehenen Träger positionieren. Das Ganze in die Mitte des angeschlossenen Inkubators legen, um gleichmässige Temperaturbedingungen für die gesamte Testgalerie zu gewährleisten, und bei 37°C inkubieren.

Schritt 9: Den Inkubator in einem Raum mit kontrollierter und homogener Temperatur anwenden (ideal bei 20–25°C).

Ablesen der Resultate
1 – Ablesen des Antibiogramms
Die Antibiogramm-Testvertiefungen können 18–24 h nach der Inkubation abgelesen werden. Das Ablesen hat während des Farbumschlages der IL-Testvertiefung von Rot nach Gelb zu erfolgen. Die "+"-Testvertiefung zeigt ebenfalls einen charakteristischen Farbumschlag von Farblos nach Rot, sofern die Keimkonzentration bei ≥10³ KbE/ml liegt. Dies ist eine Bestätigung für die Präsenz pathogener Keime, und in diesem Fall kann das Ablesen des Antibiogramms erfolgen.
























2 – Ablesen der Keimbestimmung
Nach 24–48 h bei 37°C. Die Testvertiefungen individuell beurteilen, ob es zu einem Farbumschlag und damit Bakterienwachstum gekommen ist. Nur die Malassezia-Testvertiefung kann frühestens nach 3–5 Tagen Inkubationszeit beurteilt werden.

Zusammenfassende Ablesungen sind möglich. Für Candida und Malassezia kann anhand der Testgalerie kein Antibiogramm abgelesen werden.

Testauswertung

1 – Antibiogramm
Die Testvertiefungen für das Antibiogramm gemäss folgender Kriterien einzeln beurteilen:












Für jedes Ablesen des Antibiogramms steht pro Test ein Ergebnisprotokoll zur Verfügung, mit dessen Hilfe die Ergebnisse erfasst, ausgewertet und zusammen mit dem Therapeutikum der Wahl an den Tierbesitzer ausgehändigt werden können.

Die Auswahl der Antibiotika-Testvertiefungen ist angepasst an präzise Indikationsstellungen zur Behandlung von Infektionen der Haut, des Harntraktes und zur topischen Behandlung der Ohren. Die Wahl des entsprechenden Therapeutikums soll abhängig von den Ergebnissen des Antibiogramms sowie von der jeweiligen Art des Probematerials erfolgen.

2 – Keimbestimmung
Bakterielles Wachstum wird durch einen Farbumschlag des Nährmediums ersichtlich, welcher spezifisch ist für jede Testeinheit. Für weitere Informationen siehe Packungsbeilage.

Lagerung/Haltbarkeit
Im Kühlschrank (4-8°C) lagern. Die Haltbarkeit beträgt 14 Monate ab Herstellungsdatum. Das auf dem Kit angegebene Verfallsdatum beachten.

Handelsformen und Kitkomponenten
1 Testkit mit 5 Test enthält:
- 5 einzeln verpackte Speed® Biogram Testgalerien mit Klebeetiketten
- 5 Fläschchen Konservierungsmedium
- 5 Fläschchen Kulturmedium
- 1 Fläschchen zusätzliches Kulturmedium für Staphylokokken
- 1 Fläschchen Paraffinöl
- 5 sterile Einmalpipetten
- 3 Testgaleriehalter für den Inkubator*
- 5 Ergebnisprotokolle
- 1 Packungsbeilage

*Informationen zum Bezug eines Inkubators können vom Vertreiber bezogen werden.

Vertrieb: Virbac AG, Europastrasse 15, 8152 Glattbrugg
Hersteller: Bio Veto Test, 285 Avenue de Rome, F-83500 La Seyne sur Mer